Укоренение вызревших черенков винограда в домашних условиях

[Монахова Вера Андреевна]

[url2]p://plantphys.bio.msu.ru/conferences/thesis/2007_katasonova.doc[/url2]
Ссылка что-то не получается. извините, - вот что нашла в инете:

Цито-гистологическое изучение особенностей органогенеза в каллусной культуре мягкой пшеницы
Катасонова Анна Александровна
младший научный сотрудник
Институт биологии Уфимского научного центра РАН, Уфа, Россия
E-mail: kruglova@anrb.ru
Широкое применение клеточных технологий для генетического улучшения зерновых злаков до сих пор ограничивается трудностями, возникающими при регенерации растений из культуры клеток, тканей и органов. Решение проблемы повышения выхода растений-регенерантов in vitro во многом связано с изучением типов органогенеза в каллусе и выявлением особенностей типов, ведущих к формированию регенерантов. Установлено, что органогенез в культуре клеток, тканей и органов растений включает в себя три основных этапа: 1) приобретение компетентности клетками экспланта (т.е. способности отвечать на гормональные сигналы); 2) детерминация компетентных клеток под воздействием экзогенных регуляторов роста; 3) морфогенез, протекающий независимо от экзогенных регуляторов роста (Yancheva et al., 2003). Цель исследования – изучить особенности процесса органогенеза в каллусах, полученных из незрелых зародышей пшеницы (Triticum aestivum L.). Незрелые зародыши мягкой пшеницы сорта Симбирка извлекали из зерновок на 15-17-е сутки после опыления, помещали на питательную среду Мурасиге и Скуга (Murashige, Skoog, 1962) с добавлением 2,0 мг/л 2,4-Д и 0,2 мг/л кинетина и культивировали при +260С в темноте. Полученные каллусы пассировали на исходную питательную среду Мурасиге и Скуга без 2,4-Д и культивировали при +260С на свету. Для цито-гистологического изучения каллусы фиксировали, готовили постоянные препараты по З.П. Паушевой (1988), изучали при помощи светового микроскопа. В результате культивирования каллусов из незрелых зародышей мягкой пшеницы на питательной среде Мурасиге и Скуга без 2,4-Д наблюдали образование почек, корней, либо почек и корней одновременно. В части каллусов образования органов не наблюдали. Цито-гистологический анализ каллусов, в которых визуально не наблюдали образования каких-либо органов, показал наличие в них морфогенетических очагов, являющихся ранним этапом формирования растений-регенерантов. Морфогенетический очаг состоит в основном из недифференцированных меристематических клеток, способных к дальнейшему развитию. Цито-гистологический анализ каллусов, в которых визуально наблюдали образование органов, показал, что в них присутствуют и зачатки органов – корней и почек, и еще не реализованные морфогенетические очаги. Таким образом, в каллусах, полученных из зародышей пшеницы, введенных в культуру in vitro на одной стадии развития и культивируемых на одинаковой питательной среде, индуцировались различные типы органогенеза. На наш взгляд, это связано с неоднородностью каллуса, который состоит из групп клеток, реализующих морфогенетические потенции различными путями (Батыгина, 1987). Окружающие каллусные клетки служат буферной системой между очагами и питательной средой и определяют направленность морфогенеза так, что одни очаги формируют почки, другие – корни.

Тезисы доклада основаны на материалах исследований, проведенных в рамках гранта РФФИ ( № 05-04-97911) и программы «Ведущие научные школы РФ» (грант НШ.4834.2006.4).
Автор выражает признательность профессору, д.б.н. Н.Н. Кругловой за помощь в подготовке тезисов.

http://www.biotechnolog.ru/pcell/pcell1_4.htm

http://www.activestudy.info/terminologiya-selekcii/

[зоя]

Здравствуйте,у меня черенки Красотки не дают корни,хотя другие сорта уже посажены в стаканчики с землей.Подскажите пожалуйста,может это особенность такая у Красотки?

Да и у мення таже история из 40 черенков укоренились 32.( разных сортов) Черенки были в двойном экземпляре. Черенки красотки 2шт. корни не дали и даже калюс не образовался. самый желанный Агат Донской тоже без корешков,Сделала новый срез (они живы) и поставила заново на укоринение, Кто подскажет,у Красотки такая особенность,плохо укореняться?

[sanserg]

Ссылка что-то не получается. извините, - вот что нашла в инете:

Решение проблемы повышения выхода растений-регенерантов in vitro во многом связано с изучением типов органогенеза в каллусе и выявлением особенностей типов, ведущих к формированию регенерантов. Установлено, что органогенез в культуре клеток, тканей и органов растений включает в себя три основных этапа: 1) приобретение компетентности клетками экспланта (т.е. способности отвечать на гормональные сигналы); 2) детерминация компетентных клеток под воздействием экзогенных регуляторов роста; 3) морфогенез, протекающий независимо от экзогенных регуляторов роста (Yancheva et al., 2003). Цель исследования – изучить особенности процесса органогенеза в каллусах, полученных из незрелых зародышей пшеницы (Triticum aestivum L.).

Всем здравствовать! Ребята и девчата, мы можем спорить до бесконечности, так как говорим о разных вещах.

В биотехнологии каллусом называют недифференцированные клетки, являющиеся тотипотентными и способными поэтому дать начало целому растению. Являются объектом генетической инженерии. В биологии растений каллусом называют также клетки, образующиеся на раневой поверхности растения в виде опробковевающей ткани, которая возникает в результате деления пограничных с раной клеток[1].

В биологии это раневая ткань (смотрите выше). У ученых -биотехнологов это другое понятие (так-же смотрите выше)
Давайте не будем лезть в дебри науки и остановимся на элементарной биологии.

[Монахова Вера Андреевна]

Да. спорить не о чем, то, что в каллусе находятся зачатки и почек и корней является морфологической особенностью каллусных тканей и этот факт доказан биотехнологией.
Защитную функцию у каллуса никто не отнимает - это его основная функция. И она очень даже необходима при укоренении черенков - затягивает раны. которые мы наносим черенку.
А нам более необходимо определить причины разрастания каллусных тканей, его опробковение и влияние этого на укоренение черенков и найти пути исключения этого отрицательного для укоренения явления.

[Владилен]

На форуме нежелательны мультипостинги, поэтому прошу извинить за длинноватый пост. Как уже писал, в своей многолетней практике обходился без кильчевания и укоренения черенков в комнате. Большинство сортов хорошо укореняются и вызревают в школке , в моем случае- в пленочных рассадниках. Но есть сорта- капризули типа Восторга красного, не хотят они идти в ногу со временем. А ведь сами по себе так хороши и прижились на Орловской земле.Вот причуды этого сорта и заставили меня заняться укоренением черенков в.комнате. Вариант кильчевания для себя в комнате полностью исключаю, нет условий.Но начал опыты не с Восторга красного ( зачем портить черенки), а с обычных сортов. Надо было понять на своей шкурке, при каких условиях укоренение идет лучше. Предварительные выводы следующие.
1.О сроках черенкования. Согласен со всеми: март-апрель- оптимальные сроки. Но свои опыты на небольших партиях начал гораздо раньше, чтобы при черенковании более крупных партий иметь представление, что им чертям- черенкам нужно для полного счастья. Первый срок замачивания зимой был 23 декабря, постановки на укоренение в воде -25 декабря. Первые зачаточные корешки на Любаве появились 10-12 января. Таким образом, к середине декабря черенки уже выходят из фазы глубокого покоя. А сейчас поподробнее.
2.О стимуляторах корнеобразования. Применял энерген (натриевая соль гуминовых кислот), корнесил (Гуми – 20), корневин (ООО «Агросинтез»). Дозы и продолжительность обработки: энерген – 1 ампула/л, 12 час; корнесил – 100 мг/л, 24 часа; корневин – раствор – 60 мг/л, 12 час. Контроль – отстоянная вода.
Заметных преимуществ вариантов с обработкой стимуляторами по сравнению с водой не заметил. Или препараты некачественные или дозы не те. У Любавы в воде почки распускались в среднем через 10 дней, корни появлялись через 23 дня. В растворе энергена листья распускались на 3 дня позже, чем в воде, а зачатки корней появились на 3 дня раньше, но темпы их роста были нисколько не лучше, чем в контроле.
В другом опыте (раствор корневина) корневые зачатки появлялись через 20 дней (одновременно с контролем), но в воде развились более сильные побеги, чем после обработки корневином. По-видимому, корневин иногда может сдерживать распускание листьев. В следующем опыте с обработкой корнесилом почки распускались одновременно с контролем (через 7 дней), но образование зачаточных корней происходило позже – через 32 дня. Наверное, потому, что на заключительной стадии банки с черенками были переставлены на подоконник, где температура опускалась ниже 20°С. Случаев образования каллюса на нижнем срезе черенков не отмечал, очевидно, из-за недостатка или отсутствия кислорода в воде. Образование каллюса отмечал в опыте с опилками, но опыт не закончен. Заложен также опыт с обработкой гетероауксином, но ещё не закончен. Опыт с радифармом только намечается.
3. Какой уровень воды должен быть в банке? Высота 0,5-л банки – 10 см. Радчевский рекомендует 3-4 см. Это третья часть банки. Этого правила первоначально я и придерживался. Но позже стал убавлять, т.к. много сторонников более тонкого слоя воды, ибо корни обычно образуются на границе воды и воздуха, но опыт показывает, что корни могут образоваться и выше, если: а – бороздовать черенок выше уровня воды, б – увлажнять верхнюю часть черенков любым способом; для этого банку раз в сутки наклоняю и поворачиваю вокруг оси, в – вставлять в банку вертикально кусок поролона, но после появления зачаточных корешков поролон нужно убрать, иначе корни прорастут в поролон, г – оборачивать банку чёрной плёнкой, испарение воды будет меньше, корни будут находиться в темноте, т.е. в условиях, близких к естественным. Такие рекомендации в литературе имеются Но целесообразность этого приёма мне до конца не ясна. Под чёрной плёнкой может снижаться температура в зоне корнеобразования. В моих опытах температура была около 20°С, осталось впечатление, что корни под чёрной плёнкой развивались мощнее, но несколько позже, чем в контроле (без чёрной плёнки).
4. Как поддерживать уровень воды в банке? Можно обычным подливом, можно менять периодически полностью, но в любом случае кинуть 1 таблетку активированного угля не помешает. А можно поддерживать постоянный уровень в банке с помощью автопоилки, как советует Сергей Санников ( пост от 14 января 2013 г). Для этого я использовал обычную лабораторную пробирку. Хватает надолго, точно время не засекал. Но есть недостаток. Легко это сделать в случае широкого сосуда, но есть проблемы с узким. Для устранения проблемы можно сначала наполнить банку водой почти до верха, вставить перевернутую пробирку с водой, а потом слить лишнюю воду из банки.
5. Дополнительное освещение. Все опыты проводил на письменном столе вдали от окон, но с включённой настольной лампой (60 вт.). Даже при таком освещении окраска листьев была нормальной, приостановки роста не наблюдал. Продолжительность освещения – около 10 часов в сутки в дневное время. На фото видны блики на отдельных листьях, это от включённой при съемке настольной лампы. Хлороза не было. Всего было испытано 5 сроков укоренения и будут еще другие.
6. О зелёных операциях. Из возможных вариантов выбрал вариант ограничения (прищипки) побегов примерно на уровне 2-го листа снизу. При заметном опережающем росте побегов (по сравнению с началом образования корней) центральные побеги в узле полностью удалял. В этих случаях продолжение роста шло либо за счёт пасынков, либо за счёт замещающих почек глазка. На всех фотографиях засняты в основном такие черенки.
7. О сроках пересадки в почвосмесь. Этот вопрос в зачаточной стадии. Планирую пересаживать как можно раньше, при появлении зачаточных корешков. Пробный шар уже запустил. Но на фотке сняты черенки, у которых корни уже подросли, разветвились. Посадил в баклажку, на дно которой сначала слоем 4 см. насыпал крупнозернистый песок, пролил кипятком, остудил, посадил, досыпал 6 см почвенной смеси, снова пролил тёплой водой. На фото через 4 дня после съемки – пока всё нормально. Что день грядущий нам готовит, не знаю. В баклашке – 3 растения. Приживётся хоть 1, и на том спасибо. Подарю друзьям или себе. Приживётся 2 – разделять не буду, пусть будет 2 рукава. Но большую часть опытных черенков пересаживать не буду, они свою роль сыграли, получил представление о процессе и проблемах укоренения. Позже начну укоренять в оптимальные сроки.
Резюме – у меня всё ещё впереди, жду советов по укоренению трудноукореняемых сортов. В науке существует правило: опыт следует тогда считать удавшимся, когда его можно повторить.
С уважением Владилен

DSC01235.JPG

DSC01230.JPG

[grandparents0]

Да. спорить не о чем, то, что в каллусе находятся зачатки и почек и корней является морфологической особенностью каллусных тканей и этот факт доказан биотехнологией.
Защитную функцию у каллуса никто не отнимает - это его основная функция. И она очень даже необходима при укоренении черенков - затягивает раны. которые мы наносим черенку.
А нам более необходимо определить причины разрастания каллусных тканей, его опробковение и влияние этого на укоренение черенков и найти пути исключения этого отрицательного для укоренения явления.

На мой взгляд причиной разрастания каллюсных тканей, является повышенная температура при укоренении в районе пятки.Оптимальная температура при которой каллюс не образуется или образуется в малом количестве - это 18-20 градусов. Но при этом удлинняется срок корнеобразования. Но это моё личное мнение. С уважением Николай.

[Монахова Вера Андреевна]

Я полностью с Вами согласна - повышенная температура в районе пятке во время укоренения - основная причина разрастания каллуса.
Вообще каллус начинает образовываться начиная от 15 гр, но при слишком низкой температуре образование и рост корней происходит медленно. А нам нужно быстрее - этого требует пробуждающаяся почка. Какой оптимальный вариант? Я считаю от 22 до 28гр, идеально - 25 гр.
Но, считаю. есть влияние и других факторов - среды. в которой мы укореняем, сорта. У кого есть наблюдения?
Прошедшим летом, в конце июня, у Продюсера случайно отломился очень хороший побег. Я его сунула в банку с водой. Но корни так и не появились. Почему? Потому что в это время стояла жара за 30гр Вот что образовалось:

[Nadya0710]

Ура! Мои черенки дали корешки, начало есть.http://s017.radikal.ru/i417/1303/d2/13e9167bb9b7.jpg

[анжела]

Надежда, а в чем укореняли?

[Nadya0710]

Укореняла в опилках в пакете на батарее.Правда у одного черенка заметила небольшое нагноение на концах, так я их подрезала немного.